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氰基柱、氨基柱的使用和清洗和保存

發(fā)布時間: 2022-03-21  點擊次數(shù): 8329次

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氰基柱、氨基柱的使用和清洗和保存

1、氨基柱的使用

氨基柱的鍵合官能團(tuán)氨丙基要比C18,C8柱的鍵合官能團(tuán)C18,C8容易水解,所以首先要做好其使用壽命稍遜的心理準(zhǔn)備,特別是當(dāng)使用條件是反相條件下時。

反相條件使用時,要特別注意控制PH值范圍,PH值越低越有發(fā)生水解的危險,流動相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險。

所以,在使用后以及準(zhǔn)備長時間放置時,必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機(jī)溶劑中是必需的。

當(dāng)使用氨基柱進(jìn)行酸性物質(zhì)如果汁中糖份的分析時,酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在,可能會使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化,使用一段時間后對于某類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)為柱效下降。

這時,建議:用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液沖洗該柱(沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動相洗去多余氨),之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1%。

2、氨基柱的清洗

簡單說起來,正相條件下使用的氨基柱參照硅膠柱的清洗方法;反相條件下使用的氨基柱參照C18的清洗方法。

(1)平時在正相條件下使用:

首先用50倍柱體積的異丙醇清洗,因異丙醇粘度較大需適當(dāng)放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之后,用異丙醇過渡回到平常使用的正相流動相,即可。

(2)平時在反相條件下使用:
緩沖鹽應(yīng)及時沖洗,不能直接用純甲醇沖洗緩沖鹽等,屬常識就不作特別交待。

用50倍純甲醇沖洗;之后,用異丙醇過渡后,用二氯甲烷沖洗色譜柱;之后,再用異丙醇過渡回來到甲醇條件下。

這些清洗方法,主要是針對當(dāng)樣品中有雜質(zhì)逐步吸附累積到填料上時的處理方法,色譜柱表現(xiàn)行為為諸如柱壓增高柱效降低等。

3、氨基柱的保存

正相使用時,將柱子沖洗干凈后,用正己烷-乙腈(99:1)保存。

反相使用時,如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;長期不用時需將甲醇依次用異丙醇、氯仿置換,最后用正己烷保存。




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